Examen Corrigé Enzymologie Approfondie L3 2023 PDF

Objectifs de l’enseignement: 

Comprendre au niveau structural et cinétique les interactions moléculaires protéine/protéine et protéine/Ligand, connaître le fonctionnement des différents types d’enzymes Michaéliènnes, à plusieurs substrats et allostériques, connaitre les applications du génie enzymatique en industrie). 

Connaissances préalables recommandées: 

Les pré-requis pour ce module consistent à avoir des connaissances suffisantes acquises dans la matière de Biochimie enseigné en L2. 

Contenu de la matière : 

I.Généralités:

II.Structure et propriétés des enzymes:

-Enzymes monomériques (chymotrypsine) 

-Enzymes oligomériques 

-Isoenzymes (LDH) 

-Complexes multienzymatiques (FAS) 

III.Interactions protéines-ligands: 

-Association sur un site. 

-Association sur n sites équivalents et indépendants. 

-Association d’un ligand sur deux sites différents. 

IV.Cinétique Enzymatique: 

-Cinétique michaélienne à un substrat (rappel) 

-Cinétique à deux substrats 

-Cinétique à plusieurs substrats 

V.Fonctionnement et régulation des enzymes allostériques: 

-Propriétés structurales 

-Propriétés fonctionnelles 

-Détermination des constantes cinétiques à partir de représentation graphique (Hill…) 

VI.Mécanisme de la catalyse: 

-Topologie et identification des centres actifs. 

-Fonctionnement des coenzymes. 

-Activation des zymogènes. 

-Marqueurs spécifiques des centres catalytiques. 

-Mécanismes d’action des sérines protéases. 

-Mécanisme d’action des pyridoxal transférases. 

VII.Isolement et purification des enzymes:

-Origine 

-Méthodes d’études 

VIII.Génie enzymatique:

-Nature et origine des enzymes 

VIII.1-Méthodes d’immobilisation des enzymes: 

-Méthode physique : immobilisation par adsorption 

-Méthode chimique : immobilisation par fixation covalente sur un support. 

-Immobilisation des enzymes et utilisation en bioréacteurs 

VIII.2-Applications des enzymes en biotechnologie:

-Préparations industrielles des enzymes 

- Production à l’échelle industrielle 

-Applications dans les domaines industriels (pharmaceutiques, cosmétiques, agronomiques) 

-Biocapteurs enzymatiques 

-Les enzymes artificielles 

IX.Travaux dirigés:

-L'objectif est de développer l’aptitude à raisonner sur des problèmes d’enzymologie et d'apprendre à appliquer les concepts vus en cours pour interpréter des données expérimentales. Les TD se feront sous forme de : 

-Exercices illustrant chaque chapitre 

-Analyses d’articles portant sur les différents points abordés en cours 

X.Travaux Pratique:

-Protocole de purification d’enzymes : 

-Extraction, 

-Fractionnement 

-Purification 

-Critères d’homogénéité 

-Etude des activités des enzymes et l’influence de certains paramètres physico-chimiques.